艾滋病恐惧干预公益项目
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艾滋病检测的分类,教你一分钟看懂


艾滋病检测,目前主流的艾滋病初筛方法有,斑点印迹(层析或渗滤)试验也就是金标法,酶联免疫试验(ELISA)、明胶颗粒凝集试验(PA)、和免疫荧光试验(IFA)。确认试验主要用免疫印迹试验,核酸检测,家庭用HIV其他快速筛查试验(RST)等。
斑点印迹(或免疫层析/或渗滤)试验,也就是所谓的艾滋病检测www.hiv-cdc.com试剂一般采用硝酸纤维素膜作固相载体,在载体下面有吸水衬垫可吸收加入的液体。将重组或多肽抗原包被在载体内,加入待检血清,包被抗原和被检血清中抗体结合,用胶体金(或胶体硒)代替底物连接在葡萄球菌蛋白A上,金标记蛋白A具有与人Ig结合的能力,因而可与被捕获的HIV抗体结合。若样品中有3~10min出结果,特异性较好,敏感性约相当于中度敏感的ELISA,对应急使用和自测使用,目前在国内批准注册的有:Deter-min HIV1/2(ABBOTT)和Instant CHEK-HIV1+2(EY)2种金标(硒标)快速诊断试剂。
ELISA:检测抗-HIV的ELISA法是国际上应用最早、发展最快、至今在血源筛查中普遍使用的检测技术。为了保证输血安全,试剂的敏感性不断提高,窗口期显著缩短,使输血传播HIV的危险性大幅度下降。HIV经输血传播的危险从80年代的较高水平降至近年的1/440 000~1/600000以下,1985年美国研制成功第1代试剂(用病毒裂解抗原包被的ELISA间接法),虽然敏感性、特异性均较低,但在防止输血传播HIV上起到创始作用。为了避免细胞培养蛋白导致的非特异性反应,1990年,用基因重组和成肽抗原研制成第2代试剂。次年国际上又研制成双抗菌素原夹心法第3代试剂,灵敏度提高到99%以上,特异度>95%。第3代试剂不仅可检测抗-HIV IgG,而且可检测早期出现的IgM抗体,并在1996年改进成含有“O”亚型的第3代试剂。1998年,国际上已出现第4代试剂,在检测抗-HIV的同时也可检测p24抗原
明胶颗粒凝集试验(PA):PA是一种快速的HIV血清抗检测方法。先将样品中稀释,然后分别加入经抗原致敏的和未致敏的明胶颗粒,混匀后保湿(一般为室温)由于操作简便,无需特殊仪器设备,很适合对少量标本的检测。当血清中有HIV抗体存在时,经抗原致敏的明胶颗粒与抗体发生抗原-抗体反应,根据明胶颗粒在孔中的凝集情况判读结果。目前已研制出HIV-1和HIV-2抗原共同致敏感的PA试剂(AFD HIV 1/2 PA)和HIV-1、HIV-2抗原分别致敏的PA试剂(AERODLA-HIV-1/2).目前可用于HIV1/2的筛查,后者可用一区分HIV-1型和HIV-2型。
免疫荧光试验(IFA):将HIV感染的淋巴细胞涂于玻片上,经固定后即为试验用抗原片,待检血清中的抗-HIV抗体与抗原结合后,再与荧光素标记的抗人Ig结合,在荧光显微镜下可见到含草绿色荧光的细胞和多核巨细胞(胞浆荧光)。目前国内仅在少数有条件和实验室使用。
核酸检测:HIV核酸检测有定性和定量两类,前者用于HIV感染的辅助诊断,后者常用于监测HIV感染者的病程进展和抗病毒治疗效果。其定性检测通常根据扩增产物的电泳图像判定结果,阳性结果还要进行核酸序列测定来确定:①HIV核酸检测阴性, 只可报告本次实验结果阴性,不可排除HIV感染;(2)②HIV核酸检测阳性, 可作为诊断HIV感染的辅助指标,不单独用于HIV感染的诊断,报告核酸定性检测结果时应注明反应条件和所使用的引物序列。定量检测:①按照仪器读数报告结果,应注明使用的试验方法、样品种类和样品量。②测定结果小于最低检测限时,应注明最低检测限水平。注意低于最低检测限的结果不能排除HIV感染。③应附上仪器打印的数据。

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